目的：确定桂花树中的黄曲霉毒素。法：在桂花树的黄曲霉毒素是由衍生HPLC柱后的组合技术确定的，并了解获得的桂花树的黄曲霉毒素污染。
果：根据2015年版“中国药典”的要求和指南，69批桂花树木样品未检出黄曲霉毒素。论：通过衍生化和HPLC柱后确定桂花树黄曲霉毒素的组合方法是在中国实现的黄曲霉毒素不是由黄曲霉毒素污染。[关键词]桂花树木;黄曲霉;柱后衍生-HPLC [中国图书馆的分类] R284.1 [文献代码] A [编号] 1007-8517（2017）11-0031-05黄曲霉毒素是霉菌毒素的毒性最强的毒素剧毒和致癌。自然界中，黄曲霉毒素存在于土壤中，分解有机物和植物纤维，农产品和其他食物。
曲霉特别适用于相对湿度为85％的热带和亚热带地区的生存，并产生黄曲霉毒素。国的地域辽阔，气候的多样性和复杂性在治疗过程中，储存和运输污染黄曲霉毒素与引起中国草药和中国中药材的疫病。此，中药植物中黄曲霉毒素的检测极为重要[1-4]。前，2015年版中国药典的规定，在中国的一些中药材黄曲霉毒素限制，如陈皮和脂肪的大海。木琼脂是基于中国最有价值的植物Chine.En 2016年的药物之一，广东通过立法来保护八种中国广东中药材，包括第一。桂花树在热带和亚热带地区，如越南，海南，广东主要产，在此区域的环境条件下是由真菌引起的如黄曲霉黄曲霉毒素极为敏感。此，作者使用技术加上后柱和高效液相色谱法衍生化[5-8]的意图，确定桂花树黄曲霉毒素建立一种确定桂花树木中黄曲霉毒素含量的方法，为监管机构提供技术支持。器和仪器Waters 2695/2475高效液相色谱仪和柱后衍生系统仪器;柱：Shim-PACK CLC-ODS C18英寸（150毫米×6毫米，5毫米），在Phenomenex Gemini C18（250毫米×46毫米，5微米），热ODS HYERSIL -2英寸（200 mm×46毫米，5毫米）， Agilent Zorbax SB-C18（250 mm×46 mm，5μm）;离心机：控制Thermo Scientific的Multifuge X1R黄曲霉毒素的混合物（批号：46304-U LB8422，B1，B2）G1和G2的纯度为990％，分别990％，997％和995％，Supelco公司analitical ）。
醇和乙腈是色谱纯的，水是在实验室中制备的去离子水。
005％碘溶液：取05g碘，溶于100ml甲醇中，用水稀释至1000ml（现已上市）。品：69批琼脂样品，来自国家评估抽样试验，所有样品均由老师鉴定。法和结果色谱条件流动相甲醇 - 乙腈 - 水（22:18:60），流速为10毫升/分钟，所述产物溶液是005％碘溶液，泵速衍生化为03毫升/分钟，衍生化温度为70℃。光检测器的激发波长为360nm，发射波长为450nm。
50μL注射测试溶液。照品溶液的样品制备制备取精确的参考物质混合黄曲霉毒素/ B1，B2，G1和10微克的G2的（浓度毫升，03微克/毫升，10微克/毫升，03微克用甲醇测定。
许10毫升作为储备溶液。确测量1 mL储备液，用70％甲醇补足至25 mL，充分摇匀。试品溶液的制备取2份桂花树粉末，每次10克，成锥形瓶中，准确称取，加入3克氯化钠，70％甲醇加至75％，20分钟超声波，离心5分钟（10000转/分钟），精密测量15 mL上清液，用50 mL容量瓶中的水稀释并充分摇匀。心5分钟（10，000转/分）中，用045微米孔的过滤器的过滤器，测量准确20毫升滤液，在2D / s的流速使层析免疫亲和柱，用20mL洗脱用水两次，弃去洗脱液和约2 mL空气。
15ml甲醇洗脱级分，收集洗脱液，置于2ml容量瓶中，用水稀释至刻度并摇动。溶液的制备取回收6份桂花树粉末（批号：120921YF03），每份10g到锥形瓶中，准确称量，添加02的参考股票混合黄曲霉毒素毫升（B1浓度，B2，G1，G2）。备供试品溶液的方法中的相同00495毫克/毫升，001 485微克/毫升，004微克985 / mL和0014925微克/毫升，分别。白溶液的制备取2个样品桂花树的待测试，每次10克，没有黄曲霉毒素，在锥形烧瓶中，然后准备使用相同的过程作为供试品溶液中的空白溶液。据2015年版“中国药典”中的黄曲霉毒素测定方法中记载的含量进行测定。法验证恢复测试根据该四个部分中国药典的要求：Y恢复率=测量的量 - 试样中样品的背景下，加入参考物质的量×100％测试，所述在133获得的恢复溶液被注入到色谱被记录的高效率的液体并根据所述校正曲线的方法，得到在桂花树黄曲霉毒素的回收率。图1所示。
表1所示，B1和黄曲霉毒素G1回收率为70％和110％，以及75％和110％之间的黄曲霉毒素的回收率B2和G2之间，这符合2015年版中国药典。“毒素测定法”中规定的要求。曲霉毒素混合控制溶液B1的精度，B2，G1，G2被用作基准和精度进行了研究：25的基准溶液的微升吸出并准确地注入到液相色谱仪并重复测量6次。果列于表2中。表2所示，黄曲霉毒素B1，B2，G1和G2具有在上面的色谱条件下良好的精度，相应的相对标准偏差为101％，分别087％，根据2015年版“中国药典”，109％和092％。曲霉毒素测定方法中规定的要求。制备的空白溶液为参考指标，
桂花树研究特异性，精确提取至25μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。在图2至图4中示出如在图2至图4所示，黄曲霉毒素B1，B2，G1和G2遭受在上述色谱条件下没有干扰，以及四种活性成分的分辨率在具有良好的协议2015年中国药典四版中的黄曲霉毒素用量。
定要求。方法逐步稀释获得的线性关系，获得并注射到液相色谱仪来记录色谱不同浓度的黄曲霉毒素B1，B2，G1和G2的混合物的25微升。决于色谱峰的面积和相应的稀释因子（浓度），按照的液相色谱高性能水的处理过程中获得的相应的线性关系。表3表3表明的黄曲霉毒素B1，B2，G1和G2具有在指定浓度范围，相关系数良好的线性关系是大于099更大，这是在符合2015年版中国药典。求。不同柱的耐久性的研究由于在确定的桂花树样品中未发现阳性样品，因此使用对照溶液检查不同的柱。据内容判定处理中，在由四个不同的列确定以更好地反映该塔的性能比较对照溶液的黄曲霉毒素B1，B2，G1和G2，将试验用曲霉进行黄曲霉。素B1是代表性的，并且从测量的含量，理论塔板数，分辨率因子和对称性比较柱。果显示在表4中。以看出，四种不同的柱可以有效地分离并准确地确定黄曲霉毒素B1。表明该方法的柱要求不高，并且大多数柱可以满足桂花树木样品中黄曲霉毒素的测定。过将25μl浓度为00198μg/ ml的黄曲霉毒素B1的对照溶液注入液相色谱仪中进行稳定性试验。别在0，8，13，18，25和30小时测量含量。果显示样品在30小时内。定。用该方法来检测参考溶液（浓度黄曲霉毒素B1是000.198毫克/毫升）中，使用的逐步稀释法和分步稀释的溶液精确地注射到25中的色谱μL和色谱图已被记录。图5中所示的测试使用黄曲霉毒素B1的值作为基准并通过instrument.Lorsque提供的信号，以黄曲霉毒素B1的信噪比的计算软件为约33：1，检测限根据仪器分析中仪器检测限的相应要求计算。
此阶段，基于黄曲霉毒素B1，琼脂中黄曲霉毒素的检测限为约0.2μg/ kg。用上述方法在样品中的黄曲霉毒素，黄曲霉毒素B1，B2，G1的测定，G2被确定为桂花树的样品的69个批次，没有样品木材琼脂没有被黄曲霉毒素污染。
论测定黄曲霉毒素的桂花树用柱后衍生的方法已经成立，并进行了验证方法，结果表明，该方法是好的。曲霉毒素B1，B2，G1和G2分别为69琼脂样品obtenus.Aucun木材样品批次确定被发现与黄曲霉毒素污染，这表明的木材中国的琼脂对黄曲霉毒素的污染较少。考文献[1]聪聪冉丹陈嘿阏Ma等，固相萃取分散的石墨烯氧化物吸附材料，连同多预处理清洗用于黄曲霉毒素的痕量分析中国传统专利？药物[J]。Journal of Chromatography B，2017，s1044-1045：120-126。
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