目的研究桂花树种子的提取物的抗菌活性。用扩散方法在纸上[方法]提取物的抗菌活性进行了研究，该方法牛津剖琼脂稀释法和荧光染色法。[结果]将萃取显示出光谱的抗菌活性，在禾谷镰刀菌IC50为1.65毫克/ ml和2.93毫克分生孢子IC50 /毫升，其中几丁质修正禾谷镰刀菌菌丝的量。
粒体内膜带负电荷。[结论]提取物具有较好的抗菌活性。;种子提取物;病原体;抑菌活性CLC号S-3文档标识代码项号0517-6611（2017）31-0012-03Résumé[目的]目的是研究苏铁siamensis等的提取物的抗菌活性该提取物的方法表现出抗菌活性，IC 50禾谷镰刀菌的广谱及其孢子为1.65。2.93毫克/毫升。取物被改变hypochristine和线粒体膜电位。[结论]提取物具有抗菌活性更关键intense.Mots苏铁siamensis等;种子提取物;致病菌;抗菌活性苏铁siamensis等，也被称为中国撼树和桉树是一种裸子植物地质历史上有200万年前。1]茎高，让人们吃淀粉，但它不利于多吃[2]，常作为一种药用植物，又名香蕉铁名字，香蕉香蕉，香蕉凤凰（松树）等等苏铁是在热带和亚热带地区广泛。10个属1种，在中国，而其中5位被列为林业部濒危植物。1]目前，苏铁植物经常被用来作为一个花园观赏树木和别墅[3]，和苏铁种子是药用。
4]笔者研究了桂花树种子提取物的抗菌活性，为了提出保护和利用苏铁植物的新思路。菌试验材料和方法材料：炭疽病菌，炭疽菌micotianae，禾谷镰刀菌，长蠕玉米小斑病，炭疽病菌），尖孢镰刀菌，镰刀菌，苹果腐烂病菌，玉米大尖角，球腔的所有花生通过部重点实验室提供农业和林业福建的大学教育。体肠道致病菌ATCC10987蜡状芽孢杆菌ATCC29212，粪肠球菌，ATCC27270，屎肠球菌，金黄色葡萄球菌CMCC26069，ATCC29521两歧双歧杆菌（ATCC29521）两歧双歧杆菌），ATCC11774，枯草芽孢杆菌，ATCC 1911，CMCC54004李斯特菌，CMCC（B）28001微藤黄微球菌ATCC29213金黄色葡萄球菌），ATCC25944，
桂花树阪崎肠杆菌，ATCC10536，ATCC8739，ATCC25922，O157：H7，K7大肠杆菌CMCC（B）49005藤黄微球菌ATCC9027，绿脓杆菌（ATCC9027）铜绿假单胞菌），沙门氏菌ATCC12076，ATCC12022志贺氏菌菌CMCC51252志贺氏痢疾，ATCC17202，副溶血弧菌，CMCC（B）52204，现有小肠结肠炎耶尔森菌由福建福州的中心控制和预防疾病的提供。香种子收集对农业和林业的福建大学校园，
桂花树和种皮已被删除，洗净，晒干备用。览提取法。香种子加入到400ml水中均质化，在4℃下过夜，离心以8000转/分30分钟，沥滤两次，并收集上清液并冻干以获得从所述提取物的干提取物。真菌活性测试。用于纸10的植物病原真菌的扩散法接种到培养皿中并在28℃下温育。生长真菌的圆形表面的直径为3厘米，将滤纸盘灭菌置于0.5厘米从真菌的边缘。时，提取物的15微升添加至滤纸溶液并继续培养，直到菌丝达到滤纸的边缘和观察结果抗菌。菌试验。用该方法牛津杯，50 L的细菌溶液的加入到含有5毫升液体培养基脑心浸液肉汤（BHI）的试管中并活化，在37℃，150转/ 12小时分钟，待用。热100毫升固体培养基中的1.5％BHI和在10-12培养皿（90毫米×15 mm）作为缩合倾。活细菌溶液至20毫升BHI固体加入100微升至07％在45-50℃下，并与约1×10 8 CFU / mL的细菌浓度，然后倒入含有5个牛津罩杯到水平板凝结。后退出牛津杯。恒定温度下加入50升mycorhizine 1毫克/毫升在一个阱的阳性对照，在一个添加50升无菌水的阴性对照孔，在3个孔加入粗提物，并保持在培养箱中在37℃下过夜，在4℃6至12小时，并观察抗菌活性的存在或不存在。谷镰刀菌的半抑制浓度（IC50）的测定。用上琼脂平板稀释法称量准确测试样品，并且将溶液用无菌水混合，以形成各种浓度的溶液和过滤器通过过滤器灭菌0.22微米。热熔化培养基0.7％琼脂马铃薯 - 右旋糖（PDA），并且在40-50℃下，分别吸收0.5上述样品和水的溶液中无菌和1.5毫升培养基到PDA的0.7％在培养皿中（30毫米×15毫米）。个MIX尖镰孢饼直径6mm在28℃下置于板和培养的中心，直到真菌开发见证plate.The霉菌生长直径的边缘通过交叉方法测定并计算对禾谷镰刀菌的提取物的IC 50。处理3个重复。SP50统计软件使用以计算IC50执行对实验数据的单因素方差分析回归分析和概率单位。长抑制率=菌丝（控制面板的菌丝体生长区域 - 治疗组的菌丝体生长区域）进行控制的×分生孢子抗F发芽的活性/菌丝体生长区域。皮栎。谷镰孢分生孢子的制备。
谷镰刀菌接种到基于羧甲基纤维素钠的液体介质（CMC），在28℃下搅拌4至5天至150℃/分钟，过滤孢子并用水稀释孢子无菌。约1×10 6 CFU / ml的，0.05％葡萄糖溶液等体积用供以后使用孢子溶液混合。谷镰刀菌的IC50确定分生孢子。叶片的方法用于精确称量试验样品。各种浓度将样品溶液用无菌水和过滤器使用0.22微米的过滤灭菌来制备。疗组由20微升20微升上述孢子悬浮液混合，试样溶液中的，与对照组用无菌水20微升和20微升上述孢子悬浮液混合以上。加到凹透镜中心，并将其放置在培养皿中（90毫米×15毫米），2层用eau.Hydratez润湿无菌滤纸它升温至28℃，直到对照组的发芽率超过90个％的孢子。察各组的孢子萌发和显微镜记录观察每个处理optique.Au至少300个孢子，并且每个处理重复3次。SP50统计软件使用以计算IC50执行对实验数据的单因素方差分析回归分析和概率单位。生孢子发芽率=发芽分生孢子的孢子/观察数×抑制100％=（孢子萌发对照组的评分 - 处理部件孢子的萌发率）孢子萌发的速率数/对照组×荧光染色试验100％的发芽率。谷镰刀菌接种到水（PD）马铃薯的葡萄糖培养基中，搅拌在28℃下24个小时和150转/分。菌丝PD水性培养基用等量的提取液和提取物的最终浓度混合为8.7毫克/毫升的对照为PBS中，并继续培养过夜。
照组和样品组分别用刚果红染料，并用罗丹明染料溶液，进行处理。刚果红染色1个小时，用罗丹明染色30分钟，过量的染色溶液用PBS和制备载玻片，并通过共聚焦显微镜和荧光显微镜下观察。自稳定性测试。pH稳定性。取1毫克提取物并以200升无菌水溶解。液管的提取物溶液10微升和90微升pH为2，3，4，5，6，8，9，10，11，12的缓冲液中，混合并静置30分钟。为指示菌，存在或不存在抑菌活性的用扩散法磁盘测量。存时间的稳定性。取5毫克提取物在1mL的无菌水中。100微升水果桂花树的溶液提取物在6支离心管1.5毫升，密封，并保持在20℃的恒定温度下取一个管，每3天，并保持在-20℃下以备后用。为指示菌，存在或不存在抑菌活性的用扩散法磁盘测量。果和桂花树种子的提取物的抗真菌活性的分析。图1所示，木材提取物琼脂针对尖孢镰刀菌，苹果的黑腐菌，禾谷镰刀菌，茄病镰刀菌和中国的白菜炭疽病5种植物病原菌具有抗赤霉病菌的抑制活性，抗菌活性强。IC 50测试禾谷镰刀菌的结果表明，禾谷镰刀菌的抑制作用通过增加桂花树提取物和百菌清的浓度提高。表1，对禾谷镰刀菌的提取物的IC 50是1.650至0毫克/毫升和对禾谷镰刀菌百菌清的IC50是显而易见0004-7毫克/毫升和对禾谷镰刀菌的抑制作用。比细菌低。谷镰孢分生孢子的提取物的IC 50具有对禾谷镰刀菌分生孢子并在检测到对禾谷镰刀菌的孢子提取物的IC 50抑制活性。图3显而易见的是，当所述提取物的浓度为0.23毫克/毫升，禾谷镰刀菌的孢子的萌发被促进，则抑制活性对禾谷镰刀菌随着浓度的孢子的提取物增加。后，将数据通过SPSS和萃取VIS-à-VIS禾谷镰孢分生孢子是的概率回归方程处理：概率单位（P）= 0.741 1，585x，IC50为2 ，93毫克/毫升。色测定的结果在试验染色与刚果红的荧光，通过观察菌丝的前端的着色上的图4中的箭头，治疗组在禾谷镰刀菌菌丝的提取物显示出清晰的红色荧光和荧光强度比对照组的更强。绿色荧光染色测定（图5）的结果中，该提取物处理组的荧光强度比对照组更高显著;因此，假设在施加到禾谷镰刀菌的提取物具有几丁质和线粒体内膜的质量。
变电对禾谷镰刀菌的生长产生不利影响。提取物的稳定性，使用毛壳菌菌丝作为指示菌株，以确定提取物的稳定性测试。可以在图6中，所述提取物具有真菌的抑制活性，当在20℃下放置12天，当放置了15天的抗菌活性丢失看到。可在图7中可以看出，所述提取物仍具有治疗在不同的pH值（pH值2-12）后对真菌的抑制活性。试结果表明，该提取物具有耐酸，碱和存储设施的特性。人肠道致病菌的活性，使用牛津杯法检测对人体肠道致病菌提取物的抑制活性。果表明，所述提取物琼脂种子具有抑制活性对五种类型的大肠杆菌，表皮葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌，副溶血性弧菌和小肠结肠炎耶尔森菌。论和苏铁作为观赏植物的讨论中，它被广泛用于园林，侧重于桂花树[5]的培养和管理，桂花树种子往往在苗圃[使用6]。为一个传统的中国医学，桂花树种子有抗菌作用，对多种植物病原真菌和人体肠道致病菌的广谱抑制活性。钦Tao等人[7]已经表明，根茎[1克（生药）/毫升]的含水提取物是反对表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌很强的抑制活性。种类型的抗菌肽已经从桂花树种子，抑制植物病原性真菌尖孢镰刀菌和白地霉2和植物病原性细菌如土豆轮纹病的生长分离B.甙和发根农杆菌[8]。外，已经发现，蛋白质[10]必须蛋白丝氨酸蛋白酶[9]的抑制活性和类型几丁质酶的V（10）。之，桂花树种子含有多种活性物质的进一步扩展桂花树的潜在的应用价值，值得进一步的研究和进一步探索。
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